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譜析淺談:凝膠色譜柱長期放置須注意的細節

2021-02-25 09:41:07來源:admin
 凝膠色譜柱的應用也越來越廣泛,使用過后也要對色譜柱進行保養,這樣才能使它的使用壽命更長久,在遇到什么問題時需采取相應的措施。
 
凝膠色譜柱是以剛性的球型硅膠為基質,在其表面通過共價鍵化學鍵合親水基團而成。凝膠色譜柱的填料具有高性能尺寸排阻色譜所必需的性能,即低吸附性和良好的孔徑分布;其pH適用范圍為2.5-7.5,可以使用與水完全互溶的有機溶劑,如乙腈、丙酮、甲醇或乙醇等。凝膠色譜柱適合用于分析分離蛋白質和多肽類樣品。
 
凝膠色譜柱專為合成高分子的在高溫下GPC分析而設計。盡管高度交聯的PS/DVB 粒子廣泛應用于合成高分子的分析,但是這種粒子會在有機溶劑中產生膨脹,尤其在高溫下膨脹更為明顯。凝膠色譜柱很好的解決了這個問題。填料以剛性硅膠為基質,經過獨特的表面化學修飾,在高溫和有機溶劑中可以保持極高的穩定性。此外相對于有機聚合物填料,HTP SEC填料的剛性結構減小了分離過程中的傳質,從而取得更高的分辨率和分離效率。
 
凝膠色譜柱特點:
 
1、高柱容量、高分辨率
2、寬的pH范圍 (pH范圍2-8.5)
3、使用壽命長
4、低鹽濃度洗脫,適合LC-MS分析
5、對于生物樣品無強吸附
6、極低的非特異性吸附, 高的蛋白回收率及活性回收率
7、解決多維色譜分析應用
 
 凝膠色譜柱的存放。如果色譜柱暫時不用,存放時要注意以下幾點
 
1、幾天之內的短期放置,凝膠柱則用蒸餾水來沖洗,再把色譜柱的兩頭用密封螺絲密封好即可。
 
2、如果色譜柱長期不用,僅用上述方法來處理就不行了,這時應使用色譜柱使用說明書中所指明的溶劑來充滿色譜柱,凝膠柱則不能用水了,因柱內如果有微生物的生長則會使柱效降低,此時應用0.05%的NaNs水溶液(防腐劑)來沖洗色譜柱,再將色譜柱封嚴。凝膠色譜柱長期放置時,一定要將色譜柱的兩端封嚴,以防止由于溶劑揮發而造成的柱填料干縮現象,因這可導致柱效的嚴重降低。
 
3、色譜柱應貯存在室溫下,如果放置于0℃以下的環境里,柱內就會結冰,這也將導致柱效的降低。
 
凝膠色譜柱是親水、剛性、化學和機械性能很好的球性多孔高聚物。使用pH值范圍是2-12,可以使用含有50%的混合有機溶劑為流動相。凝膠色譜柱因為有大的排阻極限和良好的校正曲線線性,所以適合分析多分散系如糖和人造水溶性聚合物。用于分離蛋白質、多肽、多糖、DNA、RNA、水溶性的有機聚合物和其他水溶性大分子樣品等。

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