影響液相色譜柱使用壽命的因素
2021-04-27 11:12:05來源：admin
流動相對液相色譜柱使用壽命的影響
液相色譜儀在以水溶液為流動相時，水溶液中的微生物例如細菌容易生長，當用水溶液或有機酸緩沖液保護柱子時，一些霉菌可能在色譜柱中滋生，堵塞固定相顆粒間的空隙。由于濕法填充技術的問世，目前普遍使用的色譜柱填料直徑一般都小于10um，流動相中的顆粒雜質很容易先沉積在柱頭然后慢慢堵塞柱子。流動相的pH值對色譜柱也有影響，特別是對化學鍵合硅膠填料，水溶液的pH蕞適范圍在2~7.5之間，當pH>8時，硅膠會釋出生成絮狀物堵塞柱子且難以復原，柱效很快降低，甚至完全失效。當在緩沖液中加入有機溶劑例如甲醇或乙腈時，鹽類的溶解度下降，會析出鹽沉淀，堵塞柱子。同時流動相中的有機溶劑和鹽會腐蝕色譜柱頭的篩板，產生柱頭凹陷。流動相的極性對柱子也有一定影響，對于硅膠柱，甲醇、水、冰乙酸等極性較大物質會破壞填料，反之，對于化學鍵合硅膠，極性小的物質如正丁醇、二氯甲烷等也起同樣的作用。堿性溶液會破壞陽離子交換樹脂色譜柱，而酸性溶液容易損壞陰離子交換樹脂柱。
樣品和固定相對液相色譜柱使用壽命的影響
液相色譜儀如果有少量或微量的樣品不能夠溶解在流動相中，在通過固定相會堵塞柱子。樣品中的顆粒雜質也會堵塞柱子。樣品組分例如糖、蛋白質等通過柱子時會產生不可逆吸附，這樣固定相的活性點被覆蓋。樣品組分還會與固定相產生反應，尤其是對于氨基柱的影響較為嚴重，因為氨基易與酐、酮形成希夫（Schiff）縮合而減少活性點，使保留時間縮短。色譜柱鍵合相基團脫落、固定相分解和活性基團變性以及會影響柱效和保留時間的顯著改變。大多數鍵合相都是通過硅氧硅鍵（Si-O-Si）連接在硅基質上，形成帶有有機基團的固定相Si-O-Si-R（R為CnH2n+1），硅氧硅鍵可能在水溶液中水解而斷裂，使鍵合基團脫落。
