“色譜那些事 ” 上期回顧：硅膠基質和聚合物基質色譜柱的保存

本期內容：色譜柱對液相色譜系統的要求

　　 不同規格色譜柱的平衡時間

　　 一般色譜柱的平衡時間取決于色譜柱的尺寸，通常在進入10-20倍柱體積，基線達到平穩后，柱子可達到平衡。 在下表總結了不同尺寸的色譜柱的平衡時間。

　　 色譜柱對流動相 pH 的耐受性

　　 一般的硅膠基質的 HPLC 色譜柱在 pH 2-8 內是穩定的。隨著科技的發展，現在也有些改性色譜柱pH耐受范圍也變得更加寬（例如：KNAUER Eurospher II C18H 和C18P 兩款色譜柱 pH 耐受范圍：1-12）。

　　 超純硅膠的固定相也可以在 pH 高達11條件下使用（KNAUER Eurospher II采用第三代超純球形硅膠），也取決于流動相pH調節劑的化學性質。比如弱堿（例如氨類），部分強堿（例如四氫吡咯）不會侵蝕硅膠的表面，因此可以作為流動相pH調節劑。不建議使用強堿。

　　 正相柱的使用范圍

　　 正相柱不僅可以在正相系統中使用，而且部分正相色譜柱也可以在反相系統中使用，比如氨基柱（正相色譜柱中最靈活的色譜柱），它可應用于正相、反相、離子交換（弱陰離子交換柱）中，在反相色譜柱中主要用于碳水化合物的分析；氰基色譜柱也可用于正相和反相（碳水化合物、甾體、極性化合物）分析。

　　注意：氨基柱正相模式轉反相模式時，請使用異丙醇小流速過夜沖洗色譜柱。流速建議 0.1mL/min, 之后再轉換到 100% 乙腈沖洗 20 柱體積，然后轉換到和流動相相同比例的不含鹽的乙腈水體系（水相不超過 40%）沖洗 20 柱體積。